碳载量低的色谱柱(色谱柱的含碳量影响化合物的保留时间)
本篇文章给大家谈谈碳载量低的色谱柱,以及色谱柱的含碳量影响化合物的保留时间对应的知识点,希望对各位有所帮助,不要忘了收藏本站喔。 今天给各位分享碳载量低的色谱柱的知识,其中也会对色谱柱的含碳量影响化合物的保留时间进行解释,如果能碰巧解决你现在面临的问题,别忘了关注本站,现在开始吧!
1、液相色谱C18色谱柱特点及相关参数
Bio-C18填料有200和300两种孔径规格,适合于肽段的指纹图谱识别,天然和人工合成多肽以及低分子量蛋白等的分离。所采用的化学键合技术可以确保ODS单分子层不会在纯水溶液中发生塌陷。
特性和用途:YMC-Triart C18:Triart系列色谱柱通常具有较高的耐久性,适用于长期的高性能液相色谱分析。特别适用于对极性化合物的分离和定量。
C18色谱柱:适合分析弱极性物质里极性更弱的物质。分子量较小的物质,经常用C18来进行分析和分离。C8色谱柱:分析弱极性物质里极性稍强的一类物质。由于C18比C8的碳链更长,因此带来更好的保留特性。
C18色谱柱:适合分析弱极性物质里极性更弱的物质。分子量较小的物质,经常用C18来进行分析和分离。C8色谱柱:分析弱极性物质里极性稍强的一类物质。由于C18比C8的碳链更长,因此带来更好的保留特性。
2、液相峰开始和结束时间过长
流动相洗脱能力较弱,如果是反相,可以增加有机相的比例,也可以梯度洗脱;色谱柱保留太强,可以用短柱,如果是反相,也可以用碳载量较低的柱子,或碳链较短的柱子;可以升高柱温试一下;如果压力允许,可以加大流速。
高效液相色谱出峰时间由多种因素决定:固定相(色谱柱填料,长短,粒径)。流动相(包括有机相水相配比,pH值,有机相组成,水相中缓冲盐组成,缓冲盐浓度,是否加入表面活性剂,是否加入离子对试剂等)。
如果你调节流速,应该是可以减少出峰时间没有问题的。不过你先得看一下你的压力是多少。一般压力控制在18MPa以下比较好,就是说你调节方法之后,压力最好不要超过180bar。不然对仪器损伤比较大。
流动相,有些试验中流动相中PH、浓度、配比的微小变化也会导致时间异常,有些现用现配的与放置时间过长的流动相跑的峰时间也可能不一样。
调整流速:流速过快会导致样品不能有效分离,而流速过慢会造成分析时间过长,选择合适的流速对于保证分析的准确性和效率非常重要1。调整流动相条件:流动相条件不合适,也会影响出峰时间,需要选择合适的流动相条件。
3、为什么普通C18色谱柱不能用纯水冲洗
容易引起疏水坍塌,把强保留物质冲出来,会毁了柱子的,所以水相不能超过95%,最开始的梯度淋洗也是高 有机相 到高水相,但是不是纯水相。
水作流动相而不会产生相塌陷,这对只溶于纯水的样品的分析提供了一个很好的选择。第三,如使用过含缓冲盐的流动相的色谱柱,用纯水冲洗,并一定能将缓冲盐完全洗去。
一般不能。hplc多用c8,c18色谱柱,而这些柱子要求最少也要有5%的有机相,用纯水相容易破坏固定性,从而使柱效下降。
一般C18或C8反相色谱柱,不能用纯水冲洗,有机相比例至少5%,否则键合相碳链会发生卷曲,导致色谱柱性能不稳定。如果是正相柱,是肯定不能用水冲的,极少量的水都可能对色谱柱造成不可逆的损害。
看是什么柱子,有一些做糖的柱子就是要求纯水做流动相的。
4、如何改变色谱条件,可以减小菲、萘、苯的保留时间?
需要增大K值,可以降低流速;需要减小K值,可以增加流速。
应该是缩短实验时间吧。一般而言,在选定色谱柱的条件下,改变流动相的比例,可以调整样品的色谱保留时间,有的情况下,缩短了实验时间,会导致一些难分离物质无法分开。
标准的方法可改进的不多,如果标准方法中注明非常详细,则空间就更小。不过一般标准中都会有这么一句:本标准所列的条件是典型的,使用者可根据实际情况对分离条件作适当调整,以期达到更好的(满意)分离度。
流动相的组成和改性剂,这个不用多说了。 梯度变化率,在出峰的时间点减慢梯度变化速度,要注意不同的系统梯度是有不同的滞后时间的。 柱温。 样品溶剂,尽量接近梯度起点。最后补充一个:减小柱外效应。
可以适当提高流速,来缩短目标物被固定相吸附的保留时间。也可以改变一下流动相的比例或梯度洗脱的比例,通过调整流动相的极性来缩短目标物被固定相的吸附时间。
到此,以上就是小编对于碳载量低的色谱柱的问题就介绍到这了,希望介绍关于碳载量低的色谱柱的4点解答对大家有用。