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  1. rna提取过程中,蛋白质和dna是如何去除的?
  2. ...做DNA、RNA提取实验时提取的基因组DNA有降解,如何解决?
  3. rna提取过程中,蛋白质和dna是如何去除的?
  4. 什么化学物质可以消除DNA

1、rna提取过程中,蛋白质和dna是如何去除的?

在RNA提取过程中,首先需要裂解细胞,以释放出细胞内的RNA。这一步骤通常使用含有蛋白酶、盐溶液和洗涤缓冲液的裂解液来实现。蛋白酶的作用是降解细胞内的蛋白质,将其转化为氨基酸。

蛋白质在有机溶剂中变性所以形成沉淀,中间那白色的是变性的蛋白质。我们做过提取DNA的实验,用的是饱和酚提取的,后来又用了氯仿的。

热酚法。本法主要用于少量细胞样品RNA提取,其产量不高,但简单易行。快速提取法。本法主要用于培养细胞,通过0.5%SDS裂解细胞,酚抽提去除蛋白质和DNA沉淀,快速纯化RNA。细胞质RNA提取法。

在抽提前还要在DNA样品中加入1/10体积的PH2的3M醋酸钠,增加盐浓度,以免DNA沉淀出来的量太少,都被抽走了。还有最好在抽提之前要把DNA样品的体积扩大,这样也可以减少抽提过程中DNA样品的损失。

2、...做DNA、RNA提取实验时提取的基因组DNA有降解,如何解决?

外源RNA酶清除剂,可以搞定。喷洒台面,浸泡处理耗材,去除外源RNA酶清除剂,避免其降解。

取培养至对数生长后期的含pBS质粒的细菌培养液250ml,4℃下5000g离心15分钟,弃上清,将离心管倒置使上清液全部流尽。将细菌沉淀重新悬浮于50ml用冰预冷的STE中(此步可省略)。同步骤1方法离心以收集细菌细胞。

加入提取液后,若是65度提取,时间太久,有可能造成部分降解。

通过变性剂破碎细胞或者组织,然后经过氯仿等有机溶剂抽提RNA,再经过沉淀,洗涤,晾干,最后溶解。但是由于RNA酶无处不在,随时可能将RNA降解,所以实验中有很多地方需要注意,稍有疏忽就会前功尽弃。

3、rna提取过程中,蛋白质和dna是如何去除的?

在RNA提取过程中,首先需要裂解细胞,以释放出细胞内的RNA。这一步骤通常使用含有蛋白酶、盐溶液和洗涤缓冲液的裂解液来实现。蛋白酶的作用是降解细胞内的蛋白质,将其转化为氨基酸。

蛋白质在有机溶剂中变性所以形成沉淀,中间那白色的是变性的蛋白质。我们做过提取DNA的实验,用的是饱和酚提取的,后来又用了氯仿的。

热酚法。本法主要用于少量细胞样品RNA提取,其产量不高,但简单易行。快速提取法。本法主要用于培养细胞,通过0.5%SDS裂解细胞,酚抽提去除蛋白质和DNA沉淀,快速纯化RNA。细胞质RNA提取法。

在抽提前还要在DNA样品中加入1/10体积的PH2的3M醋酸钠,增加盐浓度,以免DNA沉淀出来的量太少,都被抽走了。还有最好在抽提之前要把DNA样品的体积扩大,这样也可以减少抽提过程中DNA样品的损失。

4、什么化学物质可以消除DNA

活性氢氧基团能氧化DNA、RNA污染源及核酸酶等分子物质,而诺福过氧化氢杀孢子剂中的活性银离子,可以抑制DNA聚合酶等有害病菌的生长,从而更有效的防止外源DNA的干扰;5小时完成灭菌,人员可进入。

许多DNA酶需要特定的底物才能发挥其催化作用。在这种情况下,DNA水解产物可以作为底物被DNA酶进一步分解或修复。

二硫苏糖醇(DTT)是一种小分子有机还原剂,化学式为C4H10O2S2。它是处于还原状态的线性分子,被氧化后成为含有二硫键的六元环结构。二硫苏糖醇的名称源自苏糖(一种四碳单糖)。

最常用的DNA沉淀试剂为乙醇。将含有DNA的溶液与等量或略多于等量的冷乙醇混合,混合物中的DNA便会沉淀到底部。这种方法适用于提取从细胞或组织中提取的DNA。

提高DNA的纯度有以下几种方法:使用DNA抽提试剂盒重新过柱,此时其中的一些杂质会被过滤掉,从而达到提纯的效果。这个提纯的效果还是非常明显的。

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