dna降解是否会增加Dna浓度-dna降解会影响dna检测吗
大家好,今天小编关注到一个比较有意思的话题,就是关于dna降解是否会增加Dna浓度的问题,于是小编就整理了3个相关介绍dna降解是否会增加Dna浓度的解答,让我们一起看看吧。
1、提取的RNA用Dnase消化之后浓度会降低吗
其实有些dna抽提并不严格去除少量残余rna,rnase到处都有,若是质粒什么时间长了rna会自然被降解掉的。
降解方法可以用Takara,两步法先把RNA转为CDNA,然后再PCR,这样不需要每次提RNA,也可以一步法加入Total RNA。处理细节:提取的时候,用到的器具需要DEPC的水处理后高压。
有时候由于DNA污染,不得不DNA酶处理,这是很多人都选择的办法。但我们经常觉得,这种处理会严重影响RNA的质量。
消化DNA:将总RNA加入DNase消化缓冲液,用DNaseI酶消化,将DNA降解掉。纯化RNA:将消化完DNA的RNA取出后,加入等体积的Phenol/Chloroform提取试剂,混匀后转到离心管内离心10min,配合氯仿/异戊醇萃取后得到RNA。
2、...实验过程中可造成DNA降解的可能原因有哪些?
短时高温主要是造成DNA的变性,也就是DNA双链解链成为单链,但在温度下降后会恢复为双链形式。DNA在溶液,尤其是水的稀溶液中,会发生自然的降解作用。降解作用速率和温度关系不大,但是反复的冻融会加速DNA的断裂和降解。
短时抄高温主要是造成DNA的变性,也就是DNA双链解链成为单链,但在温度下降后会恢复为双链形式。DNA在溶液,尤其是水的稀溶液中,会发生自然的降解作用。
短时高温主要是造成DNA的变性,也就是DNA双链解链成为单链,但在温度下降后会恢复为双链形式。DNA在溶液,尤其是水的稀溶液中,会发生自然的降解作用。降解作用速率和温度关系不大,但是反复的冻融会加速DNA的断裂和降解。
DNA是否容易降解和溶解DNA的溶剂有关,如果用水溶解,存在一定的概率,水可能为酸性,这样就容易引起DNA降解。所以一般用TE溶解比较好,除非用TE会影响影响后续试验。比如Qiagen DNeasy kit的Elution Buffer的是pH0的TE。
可能的原因是:DNA真的降解了;最后提取出来的DNA溶液里DNA浓度太低。如果你用RNase处理过了,那么能够说明你的DNA降解的厉害。那最好使用新鲜的组织,-80度保存的组织也好,不要-20度保存的。
3、DNA降解了,会使浓度增加吗
纯度,蛋白和RNA等杂质会干扰DNA含量的测定结果 完整性。
可能是酶切过程中DNA降解了,如果是双切下来的片段很淡,可以看看切了多大的一段,太小的话容易弥散,或者没切开。双酶切省事,但是每次效率都很低,还不如单切后回收,再切一次来的好,多费不了2个小时。
dna在不同浓度的氯化钠溶液中随着氯化钠的浓度不断升高,dna溶解度呈现先降后升。
RNA降解的话,260/280有变化。提取RNA测浓度时 A260/A280 大于3的原因可能是降解。一般对于DNA,纯净的时候比值是8,而对于RNA则是接近0。
到此,以上就是小编对于dna降解是否会增加Dna浓度的问题就介绍到这了,希望介绍关于dna降解是否会增加Dna浓度的3点解答对大家有用。