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  1. 去除核酸中蛋白质的方法有哪些

1、去除核酸中蛋白质的方法有哪些

加入等体积的酚氯仿异戊醇(25:24:1)抽提之后乙醇沉淀核酸就可以了。如果不想用酚也可以用核酸纯化试剂盒。

可以用氯仿抽提之后离心,离心后分三层,下层有机层中有一些脂溶性的杂质,中间层白色絮状沉淀是蛋白,上清液中即含有核酸。也有很多试剂盒,是可以把核酸挂在柱子上,把蛋白质等杂质离心掉,这个方法即快捷又方便。

酚氯仿抽提出去蛋白质,再用乙醇沉淀得到核酸。因为酚可以使蛋白质沉淀,离心后位于水相和有机相之间,而核酸溶解于水相。在加入3M NaAc和无水乙醇在低温下可以夺取核酸分子周围的水分子,使核酸沉淀。

想要在已经抽提的蛋白标本中去除核酸,可以考虑以下几种方法:凝胶过滤,这是很容易去除小分子杂质物质的方法。如果蛋白样本和核酸的分子大小差别比较大,可以考虑用超滤的方法。

如果样品为菌或细胞,先把样品和裂解液加入PALL多孔滤板,然后离心除去蛋白质、多糖、细胞(菌)碎片,最后DNA吸附在膜中间,适用于试剂盒的生产。利用BIR-RAD的核酸提取试剂盒,直接提取。用层析法提取。

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