降解mrna模板的方法-mrna降解方式
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1、你对应用RACE技术克隆cDNA的5末端和3末端的原理有怎样的了解?
见下图）SMARTTM 5；-RACE原理先利用mRNA的3；末端的poly（A）尾巴作为一个引物结合位点，以Oligo（dT）30MN作为锁定引物在反转录酶MMLV作用下，反转录合成标准第一链cDNA。
cDNA末端快速扩增技术（rapid amplification of cDNA ends，RACE）是一种基于PCR从低丰度的转录本中快速扩增cDNA的5＇和3＇末端的有效方法，以其简单、快速、廉价等优势而受到越来越多的重视。
【答案】：PCR用于扩增代表mRNA转录物某一单位点与其3；或5；末端之间区域的部分cDNA称为快速扩增cDNA末端技术。
RACE是一种基因克隆技术，全称为Rapid Amplification of cDNA Ends，即cDNA末端快速扩增技术。RACE技术的基本原理是通过已知mRNA序列的部分信息，设计特定的引物，利用PCR技术扩增mRNA的5；和3；端未知序列，从而获得全长cDNA序列。这项技术由Frohman等人于1988年发明，并广泛应用于基因克隆和表达分析等领域。
【答案】：（1）RACE技术 基本原理：根据已知序列设计基因片段内部特异引物，由该片段向外侧进行PCR扩增得到目的序列。用于扩增5；端的方法称为5；RACE，用于扩增3；端的称为3；RACE。用途：是用于从已知cDNA片段扩增全长基因的方法。
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