提取的质粒降解（dh5α 提取质粒）
大家好，今天小编关注到一个比较有意思的话题，就是关于提取的质粒降解的问题，于是小编就整理了3个相关介绍提取的质粒降解的解答，让我们一起看看吧。
1、stbl3转化抽出的质粒容易降解吗?
一般可以忽略它的降解，我们必须知道DNA作为遗传物质，它是十分稳定的。在4度的话更加稳定，长时间放置一年半载的肯定没问题。放到-20度的话更好。
菌体悬浮不完全会导致裂解不完全，质粒的提取纯度和得率都会下降。通常需要在里面加入RNA酶（RNase A），RNA酶的作用很清楚，降解掉溶液中的RNA。通常选用Tris-HCl作为体系中pH稳定缓冲液。
还有可能是你的琼脂糖凝胶浓度太高了，浓度越高，分子筛效应越大，质粒又比较大，当然容易拖尾了。其次也可能是你的电泳电压过大；还有就是RNA污染，你提完质粒后没有用RNase降解，不过这就不叫拖尾了，称作有杂带。
放在-20的质粒一个星期，如果抽提比较好肯定不会降解，不知道你的模糊条带是酶切之前还是酶切之后，如果酶切之后的，可能是加的酶过多或酶切时间过长引起，切乱了。
2、质粒降解的速度
快。因为酶切后，原来环形的DNA被切成两条线性的，线性的要比环形跑的速度快，环状质粒是指双链环状的质粒，DNA有部分解链，因此电泳速度最慢。
超过三天会开始降解，一周后明显降解。质粒在4度可放置数个月，-20保存数年。菌液一般放在-80度能保存1年。提出来的质粒最好以沉淀的形式保存，用的时候再溶解、抽提，沉淀、再使用。
常见的离心机转速为4000-12000 r/min，其中4000 r/min可以用于比较柔和的离心操作，不会破坏DNA分子。因此，使用4000 r/min的离心可以有效地分离质粒DNA，保证其纯度和完整性。
一般可以忽略它的降解，我们必须知道DNA作为遗传物质，它是十分稳定的。在4度的话更加稳定，长时间放置一年半载的肯定没问题。放到-20度的话更好。
质粒冻融几次会降解。对于大多数标准的质粒，经过10次的冻融循环后，质粒的稳定性会受到显著影响。冻融处理会使质粒的分子结构发生破坏，导致质粒降解或失去稳定性。
3、碱裂解法提取质粒后质粒被降解可能原因有哪些?
而闭环质粒DNA配对虽被破坏，采用乙醇沉淀法得到的DNA除含有质粒DNA外。
DNA在pH5～9的溶液中是稳定的，但当pH12或pH3时，就会引起DNA双链之间氢键的解离而变性。溶液Ⅱ中NaOH浓度为0.2mob/L，加入溶液Ⅱ后，该系统的pH为10～16，因而促使染色体DNA与质粒的变性解离成单链。
现在实验室大多用的是提取试剂盒，如果自制溶液碱性过强会有可能出现拖尾现象，蛋白沉降步骤不完全也会有可能导致基因组DNA降解出现拖尾现象。类似于溶液方面的问题一般比较容易排除，而且比较容易改正。
菌群体积，碱裂解液的pH值等。菌群体积：菌量越多，则质粒的提取量就越多。碱裂解液的pH值：碱性过强会影响DNA的纯度，而过弱则会影响碱裂解效果。pH值在12左右，效果较好。
关于提取的质粒降解和dh5α 提取质粒的介绍到此就结束了，不知道你从中找到你需要的信息了吗 ？如果你还想了解更多这方面的信息，记得收藏关注本站。 提取的质粒降解的介绍就聊到这里吧，感谢你花时间阅读本站内容，更多关于dh5α 提取质粒、提取的质粒降解的信息别忘了在本站进行查找喔。
