DTT会降解吗（ddt降解）
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1、纯化的蛋白迅速降解原因?
二是不需消化，直接吸收。吸收速率快，利用率高，合成人体蛋白质高。
细胞内也存在着蛋白质降解机制之迷，即蛋白质管理机制的问题。人体中细胞外的蛋白质降解及细胞内的蛋白质降解机制的问题，勾起了人们对体外蛋白质降解的兴趣。体外的蛋白质降解模拟的是人体内细胞外的蛋白质降解模式。
、物质基础：泛素（ubiquitin）：一种76个氨基酸组成的蛋白质，广泛存在于真核生物中，又称遍在蛋白。在一系列酶的作用下被转移到靶蛋白上，介导靶蛋白的降解。
当在前后两次纯化过程中得到的蛋白分子量出现略有差别时，可能的原因有：蛋白降解：长时间或不适当的储存、处理条件可能导致蛋白部分降解，从而导致测得的分子量减小。
从整体上看，细胞内的资源（氨基酸）是有限的，因此不需要的蛋白就降解掉，同时需要的蛋白被合成。
2、镍柱纯化蛋白为什么加pmsf和dtt
加DTT是因为DTT是一种还原剂，可以打开蛋白质的二硫键，阻止蛋白质中的半胱氨酸之间所形成的蛋白质分子内或分子间二硫键。避免His-tag被包裹在蛋白结构的内部导致目标蛋白不能结合镍柱。
PMSF是蛋白酶抑制剂，目的是未了防止蛋白降解。DTT是还原剂，目的是为了防止半胱氨酸形成二硫键，造成蛋白聚集。不过镍柱纯化时如果有DTT，可能会造成柱上的镍离子被还原。
PMSF 要摇匀至无结晶时才可与裂解，PMSF属于蛋白酶抑制剂，可以减少蛋白质的降解。
纯化的蛋白加蛋白酶抑制剂基本不会有影响 蛋白酶抑制剂有很多种，比如PMSF，EDTA等等，都是一些小分子的试剂。
分离纯化的条件对蛋白性质也有很大的影响，包括你的buffer的PH值，离子的浓度等，所以纯化过程中要根据纯化的蛋白来做相应的调整。
3、镍柱纯化蛋白为什么加pmsf和dtt
加DTT是因为DTT是一种还原剂，可以打开蛋白质的二硫键，阻止蛋白质中的半胱氨酸之间所形成的蛋白质分子内或分子间二硫键。避免His-tag被包裹在蛋白结构的内部导致目标蛋白不能结合镍柱。
PMSF是蛋白酶抑制剂，目的是未了防止蛋白降解。DTT是还原剂，目的是为了防止半胱氨酸形成二硫键，造成蛋白聚集。不过镍柱纯化时如果有DTT，可能会造成柱上的镍离子被还原。
PMSF 要摇匀至无结晶时才可与裂解，PMSF属于蛋白酶抑制剂，可以减少蛋白质的降解。
纯化的蛋白加蛋白酶抑制剂基本不会有影响 蛋白酶抑制剂有很多种，比如PMSF，EDTA等等，都是一些小分子的试剂。
4、蛋白质溶液稳定因素
蛋白质溶液的稳定因素是蛋白质分子表面的水化层能够防止蛋白质分子之间的聚集和蛋白质分子带电荷，相同电荷之间会相互排斥。
蛋白质溶液稳定的主要因素是蛋白质分子表面带有水化膜。维持蛋白质溶液稳定的因素是水化膜和同种电荷。
蛋白质溶液稳定的因素有水化膜和同种电荷。水化膜：蛋白质颗粒表面大多为亲水基团，可吸引水分子，使颗粒表面形成一层水化膜，从而阻断蛋白质颗粒的相互聚集，防止溶液中蛋白质的沉淀析出。
维持蛋白质胶体溶液稳定性的两个因素是水化膜结构和带同种电荷 蛋白质（protein）是生命的物质基础，是有机大分子，是构成细胞的基本有机物，是生命活动的主要承担者。没有蛋白质就没有生命。氨基酸是蛋白质的基本组成单位。
BSA由于稳定性和溶解性好，常常被用作蛋白质的稳定剂。3，添加抗氧化剂或还原剂比如EDTA，DTT也可以有效的稳定蛋白溶液。4，添加蛋白酶抑制剂（PMSF）也有类似作用，但需要注意PMSF自身会水解，所以它的有效期比较短。
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